KRAS 基因是 RAS 基因家族成員之一。在 RAS 基因家族中，還有 NRAS 和 HRAS。 KRAS 是一種小鳥(niǎo)苷三磷酸酶，通過(guò)將膜生長(cháng)因子受體與細胞內信號通路和轉錄因子偶聯(lián)， 在細胞增殖、分化、存活和代謝等生物過(guò)程中充當開(kāi)關(guān)。

      KRAS 突變通常發(fā)生在 KRAS 基因的氨基酸殘基 12、13 或 61 處，殘基 12 （G12C、 G12D、G12R、G12A、G12S 和 G12V ） 是最常見(jiàn)的突變位點(diǎn)。KRAS[G12C]是非小細胞 肺癌（NSCLC）中最常發(fā)生的基因突變之一，它激活了 RAS/MAPK 信號通路并維持增殖 信號的轉導，從而促進(jìn)腫瘤細胞的生長(cháng)和擴散。KRAS 是癌癥中最常見(jiàn)的基因突變之一， 約 90%的胰腺癌腫瘤中都能檢測到 KRAS 突變，接受化療的胰腺癌患者的診斷后生存期通 常只有 6~12 個(gè)月，且只有不到 40%的胰腺癌患者會(huì )對 KRAS 抑制劑治療產(chǎn)生反應。

      免疫治療是 NSCLC 的一種新興療法，可通過(guò)激活患者的免疫系統抑制腫瘤生長(cháng)。有 研究表明，激活 KRAS 信號通路可上調 PD-L1 表達。KRAS 突變的腫瘤往往含有較高的腫 瘤突變負荷和較多的腫瘤浸潤淋巴細胞，表明 KRAS 突變通常與炎癥性腫瘤微環(huán)境和腫瘤 免疫原性相關(guān)，為免疫療法提供了理論依據。

      BaF3（小鼠原 B 細胞）的生長(cháng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅動(dòng)基因，讓 BaF3 不再依賴(lài) IL-3 而增殖，進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依賴(lài)的驅動(dòng)基因，用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用，原理及流程見(jiàn)下圖所示。
 

Figure 1. KRAS[G12C&A59T] BaF3 細胞的構建原理圖

1. Sanger of  KRAS[G12C&A59T] BaF3

Figure 2. Sanger of KRAS[G12C&A59T] BaF3
 

2. Anti-proliferation assay

Figure 3. CTG Proliferation Assay of KRAS[G12C&A59T] BaF3 (C13).